溫度分布驗證的8個步驟
定期對環(huán)境試驗箱內(nèi)的條件進行分布試驗，如對溫度和濕度等進行驗證是必須的，這對于符合FDA（美國食品藥品監(jiān)督管理局）的監(jiān)管要求非常關(guān)鍵[1~5]。本應(yīng)用指南提供了一些方法，有助于驗證項目符合《現(xiàn)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（cGMP）的要求，本應(yīng)用指南中所說的探頭、傳感器、數(shù)據(jù)記錄儀是可互換的，大多數(shù)建議的基礎(chǔ)是使用數(shù)據(jù)記錄儀作為傳感設(shè)備。
第1步——編寫驗證計劃
先，書面定義驗證目標(biāo)，創(chuàng)建一個所用方法的概要，并列出任何預(yù)計的障礙。在大多數(shù)情況下，這3項構(gòu)成了驗證方案的主要內(nèi)容，下面幾個注意點*好以書面形式編入驗證計劃。
必須符合的法規(guī)與要求
先審核設(shè)施質(zhì)量指南中所列內(nèi)容（如：CFR 210、211等），并查找*近的修改或更新。盡管許多監(jiān)管機構(gòu)要求提供受控空間的溫度分布試驗結(jié)果，但并沒有規(guī)定任何具體方法，因此需要我們編制文件以說明合理的分布試驗流程。
要求監(jiān)測的數(shù)據(jù)點
數(shù)據(jù)點的數(shù)量受多種因素影響而不同，這些因素包括環(huán)境、溫度/相對濕度范圍和具體應(yīng)用。小型試驗箱的分布試驗所需的典型數(shù)量包括：
九（9）：在大多數(shù)情況下，這是試驗箱內(nèi)采樣點數(shù)量的*低限度（除了非常小的試驗臺應(yīng)用）。具體包括兩層，每層4臺記錄儀放置于每個角，中央1臺。
或者，十五（15）：三層，4臺記錄儀放置于每個角，三層中央各1臺。
或者，每層擱板上4臺或5臺記錄儀。
每臺數(shù)據(jù)記錄儀擺放的位置
建議放置記錄儀時以網(wǎng)格狀均勻分布，同時監(jiān)測試驗箱內(nèi)因熱損耗和/或空氣流動而導(dǎo)致的*差位置也是很重要的。監(jiān)測試驗箱各個角落和任何開口/通道附近將覆蓋大部分的*差位置，但是，在試驗箱內(nèi)架設(shè)擱板可能要求確認(rèn)額外的*差位置。將傳感器放置在溫控裝置的控制傳感器，或試驗箱內(nèi)任何報警傳感器的位置或附近。
試驗箱負(fù)荷
分布試驗是在空箱時進行（為了運行確認(rèn)-OQ），還是在試驗箱裝滿產(chǎn)品時進行（為了性能確認(rèn)- PQ）？對于大多數(shù)制藥或生物技術(shù)應(yīng)用來講，兩項測試都很重要。 要考慮到運行確認(rèn)和性能確認(rèn)對過程的影響。并且，有些監(jiān)管機構(gòu)[2] 要求在驗證過程中使用*大和*小負(fù)荷?？障淇梢员徽J(rèn)為是*小負(fù)荷，也通常是箱內(nèi)溫度波動*壞的情況。
跟蹤試驗箱內(nèi)空氣溫度
跟蹤試驗箱內(nèi)產(chǎn)品的溫度，如溶液瓶中的溫度，有時被認(rèn)為更重要，原因是它使數(shù)據(jù)不容易受到門定期打開和關(guān)閉等輕微干擾的影響。
測量的參數(shù)
如果計劃存儲對濕度敏感的產(chǎn)品，那么試驗箱除了溫度還要做相對濕度的分布試驗。
提取讀數(shù)的頻率
典型的采樣頻率是每分鐘1次，或者5分鐘1次。但是，如同驗證的大多數(shù)其他方面，要準(zhǔn)備論證采樣頻率，并把合理說明包括在計劃和/或方案中。
分布試驗的時間
試驗時間各不相同，可能須提供理由。典型的試驗時間長度為24、48或72h，也偶爾有設(shè)施的分布試驗時間需要1周、1個月甚更長。對于實驗室規(guī)模的試驗箱和步入式試驗箱，24~72h就足夠了。但是，對于內(nèi)部溫度受外部溫度影響的較大規(guī)模項目（如溫控倉庫），可能需要較長的試驗時間。較大型的試驗箱可能還需要在夏季和冬季進行試驗，根據(jù)設(shè)施所在地的季節(jié)溫度變化情況而定。
持續(xù)時間
提前制定測試時間表可使驗證技術(shù)人員放置好所有數(shù)據(jù)記錄儀，從而能夠同時開始和停止數(shù)據(jù)采集。

重復(fù)測試的時間
盡管有些行業(yè)只需要進行初步確認(rèn)，但有些就要求定期重復(fù)進行溫度分布試驗。再一次對任何適用的規(guī)范進行審核，并確保在驗證計劃/方案中記錄下預(yù)定的測試頻率。一般來講，盡管初步確認(rèn)包括空載試驗箱和滿負(fù)荷試驗箱的分布試驗，但隨后的重復(fù)確認(rèn)僅要求滿負(fù)荷試驗箱的分布試驗。
其他類型的測試
大多數(shù)情況下，監(jiān)管機構(gòu)只需要驗證空載試驗箱和滿負(fù)荷試驗箱。但是，其它類型的測試可能會提供有價值的信息。可能對企業(yè)有用的兩種常見測試為：
溫度恢復(fù)試驗：此項試驗使用與分布試驗時同樣位置的相同探頭數(shù)量，測量時間間隔為15~30s。在試驗箱溫度保持穩(wěn)定和數(shù)據(jù)記錄儀記錄數(shù)據(jù)時，試驗箱門打開，打開時間通常是試驗箱的正常運行時間（可從實驗室規(guī)模試驗箱的1min，到集貨區(qū)/收貨區(qū)使用的大型步入式試驗箱的5min），然后關(guān)閉。數(shù)據(jù)采集持續(xù)到試驗箱恢復(fù)到指定的工作范圍時為止。這一測試表明，在試驗箱正常運行期間，產(chǎn)品溫度沒有受到不佳影響。
絕緣導(dǎo)熱系數(shù)/溫度變化試驗：此項試驗也采用與分布試驗相同的設(shè)置和測量時間間隔。在試驗箱溫度保持穩(wěn)定和數(shù)據(jù)記錄儀記錄數(shù)據(jù)時，切斷試驗箱溫控裝置的電源。數(shù)據(jù)采集時間通常持續(xù)12h。此項試驗提供在停電情況下試驗箱保持在指定工作范圍內(nèi)時間長短的信息。此項試驗獲得的數(shù)據(jù)可有助于確定停電后產(chǎn)品是否受到不利影響，以及制定停電情況下將產(chǎn)品轉(zhuǎn)移到其他試驗箱/設(shè)施的作業(yè)流程。
以上問題許多都可以在過去的作業(yè)實踐、方案或標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序（SOP）中找到答案。
第2步——檢查設(shè)備與文檔
在實施《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GMP）的情況下，必須確保被用于執(zhí)行試驗箱確認(rèn)的設(shè)備不僅適合作業(yè)，還必須處于良好工作狀態(tài)。這里涉及到兩個因素：
用于這一應(yīng)用的記錄儀是否已被驗證？*好是設(shè)備制造商提供專門用途的IQ/OQ驗證協(xié)議。
傳感器目前是否在校準(zhǔn)期內(nèi)？檢查校準(zhǔn)證書（也是由制造商提供）。驗證軟件還應(yīng)顯示校準(zhǔn)日期信息，這些信息通常存儲在每臺設(shè)備的內(nèi)存中。如果使用熱電偶，前校準(zhǔn)和后校準(zhǔn)都必須進行。對于校準(zhǔn)是溯源NIST(美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院)的數(shù)據(jù)記錄儀，無需進行前后校準(zhǔn)。
第3步——確認(rèn)設(shè)備運行狀態(tài)
使用設(shè)備前檢查有無損壞。設(shè)施的標(biāo)準(zhǔn)操作程序應(yīng)含有這一檢查。如果沒有，有幾種方式可確保正常操作。例如，如果數(shù)據(jù)記錄儀存放在一起并準(zhǔn)備“打包”（連續(xù)“滑動窗”方式讀取讀數(shù)），只需將數(shù)據(jù)記錄儀收集的信息轉(zhuǎn)移到PC機上，然后與不同數(shù)據(jù)記錄器的讀數(shù)比較。如果記錄器沒有存放在一起，還有一種方法可以確認(rèn)它們的功能，即將記錄儀并排短時間放在一起來比較讀數(shù)。為了降低使用任何未經(jīng)校準(zhǔn)的設(shè)備的風(fēng)險，可采用幾種方式來檢查校準(zhǔn)情況。
測量讀數(shù)與正常值相差很大是出現(xiàn)問題的明顯跡象。如果環(huán)境保持穩(wěn)定，查看是否有化學(xué)污染影響了傳感器的測量結(jié)果?；蛘?，如果記錄儀中斷，斷路等物理損壞可能就是原因。對于讀數(shù)偏離原因不太明顯的情況，無需將記錄儀送到校準(zhǔn)實驗室就可以進行快速的精準(zhǔn)性檢查，即只需將記錄儀與其他經(jīng)過校準(zhǔn)的（可溯源NIST）數(shù)據(jù)記錄儀，或者溯源NIST的儀器進行比對。*后，將任何可疑的記錄儀與認(rèn)可的參考標(biāo)準(zhǔn)（如冰浴或飽和鹽溶液環(huán)境）進行比較，這是另外一種“健全檢查”。
第4步——設(shè)置數(shù)據(jù)記錄儀
在驗證軟件中設(shè)置測試開始和停止時間、采樣時間間隔和記錄儀描述。
延遲開始時間，確保有充分的時間進行設(shè)置和放置所有的數(shù)據(jù)記錄儀，并且在數(shù)據(jù)采集開始前使試驗箱保持穩(wěn)定。
為所有數(shù)據(jù)記錄儀配置相同的開始和停止時間。開始/停止時間同步化將可以避免采集到無關(guān)數(shù)據(jù)。
設(shè)定一個適合應(yīng)用的采樣時間間隔，一個典型的“安全”采樣時間間隔可能是每分鐘1次。
為每臺數(shù)據(jù)記錄儀設(shè)置有一定含義的描述。例如，每臺數(shù)據(jù)記錄儀可以有一個ID編號，來描述其在試驗箱中的位置。
第5步——放置數(shù)據(jù)記錄儀
按照驗證方案、圖表或網(wǎng)格狀將傳感器放置在試驗箱中。可以對試驗箱內(nèi)部進行拍照，顯示出記錄儀和產(chǎn)品的位置。如果使用的是探頭式傳感器（而不是內(nèi)置傳感器的記錄儀），一定要確保它們在試驗箱內(nèi)與任何表面沒有接觸。此外，還要在試驗箱之外放置一臺數(shù)據(jù)記錄儀，以監(jiān)測室外溫度，或是室外溫度和相對濕度同時監(jiān)測，否則可能會造成結(jié)果無效，因為外部溫度有時會顯著影響內(nèi)部性能。外面的數(shù)據(jù)記錄儀需要遠離容易受溫度影響的區(qū)域，如外墻、發(fā)熱設(shè)備、靠近窗戶或高流量的區(qū)域。
第6步——定期檢查進度
*好定期檢查試驗結(jié)果，確保分布試驗按預(yù)定計劃進行。例如，典型的驗證方案可能需要驗證技術(shù)人員，確定試驗箱內(nèi)溫度何時穩(wěn)定，或是在試驗過程中檢驗運行情況。使用“扁平電纜（flat cable）”可在不影響試驗箱的情況下定期檢查一臺記錄儀的數(shù)據(jù)。
第7步——檢索和存儲數(shù)據(jù)
完成試驗后，將數(shù)據(jù)從每臺數(shù)據(jù)記錄儀上傳輸?shù)絇C機上。定制文件名格式，方便查找文件，并與部署關(guān)聯(lián)起來。建議將軟件設(shè)置成自動在文件名中包括以下信息：數(shù)據(jù)記錄儀的序列號、數(shù)據(jù)下載的時間和日期、數(shù)據(jù)記錄儀的用戶描述。大多數(shù)驗證軟件都能提供防篡改的安全文件，以符合21 CFR（美國聯(lián)邦法規(guī)）第11部分中 FDA對電子記錄的要求。每個文件必須是唯壹標(biāo)識，使用戶能夠?qū)⒚糠荽蛴≥敵龅奈募c數(shù)據(jù)記錄儀中的原始文件對應(yīng)。
第8步——報告結(jié)果
可以采用幾種不同方式報告分布試驗的結(jié)果：將所有數(shù)據(jù)記錄儀的文件可以繪制在一張圖表上，以顯示出試驗箱不同部位的差別；或?qū)⑺凶x數(shù)和相關(guān)時間及日期的“原始數(shù)據(jù)”打印出來，以支持以上圖表；還可將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Excel，便于以后的報告。
在報告中一定要明確數(shù)據(jù)記錄儀在每個位置記錄下的*高、*低和平均溫度。在某些情況下，將每個位置的平均動態(tài)溫度包括進來也很有價值，這個信息在確定試驗箱中任何熱點或冷點時很有幫助，因為這些地方應(yīng)該放置連續(xù)監(jiān)測和報警傳感器。